联科生物EasyGo!™一步法ELISA技术帖
技术要点： 重溶或者混合蛋白的时候，要始终避免气泡产生。 避免交叉污染，在进行标准品加样、样本加样，以及不同试剂加样的时候，请更换枪头。不同的试剂，使用不同的加样槽。 在应用自动洗板机时，加入洗液之后，设置30秒的浸泡程序，或者在不同的洗涤步骤将微孔板掉转180度，这样可以提高分析的准确度。 为保证结果的精确性，孵育前后请封好封板膜。 显色底物在添加之前应是无色的。保持显色底物始终处于避光态。 终…
2023-06-27
ELISA通关必备丨数据篇丨标准曲线不佳
ELISA实验加入显色底物后，标准品有颜色，但结果分析发现标准品最高点吸光值偏低或偏高、标准曲线无梯度等等，总结如下原因： 一、标准曲线最高点吸光值偏高，超出仪器检测范围 ELISA标准曲线最高点的吸光值一般在3.0以下，若太高超出仪器检测范围，显示OVER FLOW，可能原因： 序号 可能原因 解决方法 1 如OD绝对值靠谱，则显色过度 TMB显色体系中建议根据S1，S2颜色进行判断， 当S1，…
2023-01-17
关于流式细胞仪你了解多少？
流式细胞术是一种对溶液中单个细胞或颗粒进行快速、多参数分析的技术。流式细胞仪利用激光作为光源，照射在细胞上，产生散射光和荧光信号，由检测器如光电二极管或光电倍增管读取。之后，这些信号被转换成电子信号，由计算机进行分析，并写入标准格式(.fcs)数据文件。另外，细胞群可以根据其荧光或散射光的特性进行分析或分选。 用于流式细胞术的仪器在过去的几十年里不断“进化”着，以满足越来越多的科研与临床应用需求。…
2023-01-04
ELISA通关必备丨操作篇丨常见问题及解决方案
一、为什么所有试剂和检测样本要平衡至室温后再进行加样操作？ 温度是ELISA结合反应的重要影响因素。为了使所有样本在一致的温度下反应，实验前务必将所有试剂平衡至室温，包括检测样本。避免因温度的动力学反应差异而导致ELISA检测结果的不准确。 二、如何获得良好线性的标准曲线？ 按照推荐方式保存标准品；溶解标准品之前需短暂离心，彻底收集粉末；确保标准品完全溶解和混匀（大约10min），然后再进行后续的…
2022-12-06
ELISA通关必备丨操作篇丨溶解与稀释标准品
ELISA标准曲线是结果计算的尺子，标准品是ELISA 实验成功与否的关键点。怎样正确溶解、稀释标准品呢？ 粉末标准品短暂离心，让因运输沾到管盖、管壁的标准品沉到管底。 根据瓶标签加入一定体积的蒸馏水，加水后轻柔涡旋震荡，室温静置溶解 10-30min，让粉末完全溶解。注意：加水后暂不用移液枪吹吸，避免蛋白未溶解，枪头带出部分蛋白，待完全溶解后可吹吸或涡旋振荡混匀。 标准品梯度稀释： 标准品稀释液…
2022-10-10
ELISA通关必备丨样本篇丨不常见样本
利用ELISA（酶联免疫吸附测定）进行检测的样本类型包括常见的血液（血清、血浆），组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清以及不常见的皮肤组织、尿液、粪便、肺泡灌洗液、唾液、脑脊液、胸腹水等，这些样本收集的时间、处理方法和保存都会影响到ELISA实验的结果。下面对几种不常见样本处理方法整理，希望对您有所帮助。 唾液 在唾液样本采集之前，受试者被建议不要吃东西、抽烟或喝饮料。用盐水彻底漱口后，采集唾液3 …
2022-09-14
ELISA通关必备丨样本篇丨常见样本丨组织
利用ELISA（酶联免疫吸附测定）进行检测的样本类型包括常见的血液（血清、血浆），组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清以及不常见的皮肤组织、尿液、粪便、肺泡灌洗液、唾液、脑脊液、胸腹水等，这些样本收集的时间、处理方法和保存都会影响到ELISA实验的结果。下面对常见组织样本处理方法整理，希望对您有所帮助。 ■ 组织样本一般是制成组织匀浆，处理方法如下： 取适量组织块，于预冷PBS（02mol/L, …
2022-08-29
ELISA通关必备丨样本篇丨常见样本丨细胞
利用ELISA（酶联免疫吸附测定）进行检测的样本类型包括常见的血液（血清、血浆），组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清以及不常见的皮肤组织、尿液、粪便、肺泡灌洗液、唾液、脑脊液、胸腹水等，这些样本收集的时间、处理方法和保存都会影响到ELISA实验的结果。下面对常见细胞样本处理方法整理，希望对您有所帮助。 细胞样本根据目的物所在部位可选择细胞裂解液或细胞培养上清作为样本。 需要注意的是： 因该类样本干…
2022-08-16