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如何确定细胞因子的种属交叉活性

世界上的物种丰富多彩，从无脊柱动物到脊椎动物都可能有细胞因子的表达，而且各种动物都可能成为生物学家的研究对象，所以有时需要特定动物，如牛、狗、猫、鱼等的细胞因子来做实验。 目前有2个现实问题需要解决： 1. 商品化的细胞因子多数是重组人、大鼠或小鼠的，针对特殊物种的重组细胞因子很难买到。那么重组人、大鼠或小鼠的细胞因子是否能用于培养特殊动物来源的细胞呢？ 2. 即使对于常见种属(人，小鼠和大鼠)，…

2018-11-09
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如何计算细胞因子的活性单位值

细胞因子是有生物活性的蛋白，在文献中经常会看到细胞因子的工作浓度用units来表示，比如Human PDGF-BB的使用浓度是120 units/ml。 这时遇到的问题是我们的细胞因子 (如PeproTech的100-14B Human PDGF-BB)是以ug或mg来购买的，如何知道1 ug或1 mg的PDGF-BB中多少个活性单位，即units呢？ 要回答这个问题，我们首先要明确ED50的概念…

2018-11-07
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流式核内蛋白染色步骤

使用MultiSciences FoxP3/Transcription Factor Staining Buffer Kit (#IC001)染色步骤如下： 染表面抗体，按说明书条件孵育全血样本孵育抗体后加入不含固定剂的溶血素（按厂家说明操作），溶血完毕 加入2ml流式染色缓冲液，300-400g离心5分钟，弃去上清 用 3 倍体积的固定/破膜稀释液（#ICD01）稀释固定/破膜浓缩液（#ICC0…

2018-11-06
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PeproTech细胞因子溶解稀释方法

一、查看说明书 1. 确定合适的溶解液 收到产品后，首先应查看说明书中细胞因子储存和处理的方法。见下图： 2. 确定合适的温度 图中的表格给出了细胞因子在冻干粉(lyophilized)状态下的溶解(reconstituted)和稀释(extended storage)的储存温度以及时间，您可以根据自己的实际需要选择。 二、溶解 1. 离心 收到的管子内为冻干粉，开盖前要快速离心10000-120…

2018-11-01
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饶毅手记：30年前做基因测序和“基因治疗”

导读： 1988年2月22日，我对自己新发现的基因开始准备进行基因测序，这一工作遇到困难，终于在1988年8月8日完成。其后，我做了转基因，将我克隆和分析过的DNA导入动物体内，它可以“治疗”动物脑发育的“疾病”。 在得到c13的cDNA后，应该可以很快进行序列分析（DNA测序）。但是因为一个技术环节的问题，我从1988年2月22号到6月26号来回兜…

2018-10-31
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小科讲堂第2期：ELISA实验注意事项及常见问题

http://www.liankebio.com/article-information_Dynamic-2450.html 作者：联科生物 发布日期：2018-10-26 09:00 小白：学习完ELISA原理及质控意义，那么ELISA操作过程需要注意什么呢？ 小科：Good，如何得到完美ELISA结果。这期将为大家讲解： ? ELISA实验注意事项； ? ELISA实验常见问题； ? ELIS…

2018-10-26
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总感到昏昏欲睡吗？基因突变增加睡眠需求

http://www.liankebio.com/article-information_Dynamic-2442.html 作者：佚名 发布日期：2018-09-27 09:00 睡眠对动物正常运转不言而喻，但是有关动物为什么需要睡眠，调节睡眠的生理机制以及人类睡眠模式的不同变化我们还了解甚微。 《PNAS》杂志一项最新研究指出，一种小鼠蛋白的单一突变会对小鼠的睡眠方式和清醒水平产生重大影响。这…

2018-09-27