Th细胞检测方案 - 技术要点汇总

Th检测一般操作步骤 人/小鼠/大鼠Th检测方案 人/大鼠Th1/Th2CD3/CD8/IFN-γ/IL-4小鼠Th1/Th2CD3/CD4/IFN-γ/IL-4 由上图可知,抗凝剂选择肝素钠或肝素锂,不影响Th细胞的活化和细胞因子的分泌。 非肝素抗凝血(如ETDA、枸橼酸钠抗凝血),可通过淋巴细胞分离液处理后,再进行刺激/阻断,仍然可以检测到细胞因子,如下图:

Th17 检测原理和样品处理方法

组分25T抗人 CD3, FITC (克隆号:OKT3)150 μl抗人 CD8α, PerCP-Cy5.5 (克隆号:RPA-T8)150 μl抗人 IL-17A, PE (克隆号:(64DEC17)150 μl佛波酯/离子霉素混合物 (250×)100 μl布雷非德菌素 A/莫能霉素混合物 (250×)100 μl固定破膜剂试剂…

人 Treg 试剂盒操作步骤

制备 PBMC,并调整细胞浓度至 107/mL。 在每个流式上样管中加入 100 μL 准备好的细胞悬液,细胞数约为 1 × 106 个。 按照细胞表面抗原染色方法标记 CD4 和 CD25。根据说明书和抗体管上的标识确定抗体用量(一般来说是 20μL,可能随批次有差异)。按个人要求设置空白管、对照管、补偿管和样本管。4℃ 孵育 30 分钟。 用预冷 PBS 溶液洗涤细胞,300-400 g 离心…