常有客户来问“我要做ELISA，血液样本是用血清还是血浆？”今天，我们从血清血浆的制备和区别来看看如何选择？
一、血清、血浆的概念及区别
人体或者实验动物抽出来的血称为全血，里面含有血浆、血小板以及红细胞、白细胞等各类细胞。
血清是血液凝固析出的淡黄色透明液体。如将血液自血管内抽出，放入试管中，不加抗凝剂，则凝血反应被激活，血液迅速凝固，形成胶冻状凝血块。凝血块收缩，其周围所析出之淡黄色透明液体即为血清，也可于凝血后经离心取得。在凝血过程中，纤维蛋白原转变成纤维蛋白块，所以血清中无纤维蛋白原，这一点是与血浆最大的区别。
血浆是离开血管的全血经抗凝处理后（常见的抗凝剂如EDTA、枸橼酸钠、肝素等），通过离心的方法，从而获得的上层不含细胞成分的液体，血浆含有纤维蛋白原（纤维蛋白原能转换成纤维蛋白，具有凝血作用）。
产生血清的凝血过程，是凝血因子按一定顺序激活，最终使纤维蛋白原转变为纤维蛋白，纤维蛋白单体相互连接形成不溶于水的纤维蛋白多聚体，并彼此交织成网，将血细胞网罗在内，最终形成血凝块的过程。所以，血清中不含血细胞，也不含有纤维蛋白，只有少数几种凝血因子（Ⅸ、Ⅹ、Ⅺ、Ⅻ）。
血浆是阻止凝血过程的发生，并通过离心沉淀细胞后的液体部分，里面含有纤维蛋白原和各种凝血因子（正常人体血浆当中至少含有除凝血因子Ⅲ外的其余11种凝血因子）。
此外，钙离子在血清中的浓度也明显低于血浆，因为钙离子也参与体内凝血的过程，在凝血过程中消耗较大。
而其他成分，比如白蛋白，球蛋白，糖类，脂类，维生素，激素，除钙离子外的其他无机盐，血清和血浆中差不多。
所以我们在判定选血清还是血浆样本时，主要看所测指标是否是凝血功能类指标，若是检测凝血功能类指标最好选择血浆样本。对于其他类型指标，如细胞因子、激素等指标，通常情况下血清或血浆都可以。
二、ELISA实验前，血清和血浆的制备
血清样本：离心管收集全血。血样凝集30分钟后，1,000 × g 离心10分钟，取上清，对上清进行分装保存。-20℃保存，1个月。-80℃，保存3个月。
血浆样本：EDTA、枸橼酸钠或肝素抗凝管收集全血。1,000 × g 离心管30分钟，取上清，对上清进行分装保存。-20℃保存，1个月。-80℃，保存3个月。
三、ELISA样本的溶血现象
另外，我们在ELISA血液样本准备过程中，要避免溶血现象的发生。溶血，即血液中红细胞因为内外界各种原因破裂，红细胞中血红蛋白逸出，导致血清、血浆由淡黄色变为血红色。
溶血过程中，红细胞其他成分也一样逸出，会对一些检查指标的含量产生影响，比如乳酸脱氢酶、肌酸激酶等会显著升高。
此外，可能是因为样本中游离的血红蛋白非特异性吸附在酶标板上，血红蛋白中的亚铁血红素具有类似过氧化物酶的活性，会催化ELISA最后一步酶促反应中的底物TMB，引起假阳性。
实验过程中如果发生溶血现象，尽可能重新采血。若无法重新采血，只能根据自身需要测量的指标，将溶血与非溶血样本进行对照试验，判断是否有影响，结果是否可信。
上面提到，血清和血浆的主要区别是纤维蛋白和几种凝血因子的不同。凝血因子除12种主要凝血因子（凝血因子Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ、Ⅶ、Ⅷ、Ⅸ、Ⅹ、Ⅺ、Ⅻ、Xll。因子VI事实上是活化的第五因子，已经取消因子VI的命名。）外，还有辅助凝血因子。
联科生物有下面两款与凝血因子相关ELISA的试剂盒：
